判斷3M測試片的方法

　　①無論大小和顏色深淺，菌落總數測試片中都含有一種紅色指示染劑，能使菌落呈紅色，便於計數，計算出所有的紅色菌落。

　　②在25~250範圍內，3M測試片菌落計數合適。

　　③3M測試片的計數麵積約為20cm2。每個黃色方框的麵積為1cm2。當菌落總數超過250時，可以選擇其中一個或幾個有代表性的小方框(1cm2)來估計菌落數。計算平均菌落數，然後乘以20得到測試片上的菌落數。

　　④如果3M測試片上的菌落太多而無法計數，則記錄為“TNTC”。

　　⑤菌落數量較高，使整個生長區域變成粉紅色，或者隻是觀察到生長邊緣區域的單一菌落，記錄為“TNTC”。

　　⑥菌落數量較高，有時菌落分布不均勻，記錄為“TNTC”。

　　⑦可以看到直徑較大的菌落，可以計數，但仔細觀察時，會發現計數區域分布著密集細小的菌落，此時記錄為“TNTC”。

　　3M測試片的方法

　　①當3M測試片未開封時，放置在≤8℃冷藏，注意外包裝上的保質期。打開包裝時，應在室溫下。如果已經打開，用壓條或膠帶密封，放在室溫下，一個月內用完。

　　②將樣品放入無菌均質袋或均質杯中，加入無菌稀釋劑攪拌或均質樣品，用稀鹽酸或稀氫氧化鈉將pH調至6.5~7.2。注意:含有檸檬酸鹽、酸性亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽的緩衝液不能用於無菌稀釋液，會阻礙生長。

　　③將3M測試片放在平坦的表麵，保持水平，揭開上層膜，將1毫升樣液垂直滴入移液器或滴管中間。然後慢慢把上層膜掉下來，盡量不要有氣泡，不要滾下上層膜。

　　④將壓板的圓形內凹麵朝下，放在上膜中間，然後輕輕按壓，使樣液均勻覆蓋在圓形培養基麵積上，切勿扭轉壓板。

　　⑤拿起壓板，靜置1分鍾以上，等待培養基凝固。然後測試片的透明麵朝上，*可以疊放20片，放置在36℃，培養48小時，保持培養箱的濕度。