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    了解細胞培養基的成分後,再也不會犯愁選哪種了!

    2021-06-09

       細胞培養市場上有不同品牌,不同種類的基礎培養基,但是其配方都是大同小異,都含有幾種相同的重要組分,那麽亚洲精品水蜜桃逐一說明。

      1、葡萄糖

      葡萄糖濃度代表什麽

      培養基中的葡萄糖濃度範圍從1g/L(5.5mM)到10g/L(55mM)

      5.5mM的葡萄糖濃度與體內正常血糖的濃度類似

      高糖培養基可以滿足腫瘤細胞等非生理狀態細胞的體外培養需求

      選擇高糖還是低糖培養基

      根據不同細胞類型選擇

      通常原代細胞、幹細胞使用低糖培養基

      永生細胞係等病理狀態的細胞使用高糖培養基

      2、丙酮酸鈉

      作用

      葡萄糖不足時為細胞提供碳源

      直接進入三羧酸循環,可以被快速利用

      什麽情況下添加丙酮酸鈉

      之前培養條件已含有丙酮酸鈉

      代謝旺盛的細胞

      丙酮酸鈉的貯存液濃度一般為50mM,-20℃保存,培養基中的終濃度為1mM.

      3、酚紅

      pH值指示劑

      培養基顏色的變化幫助細胞培養者判斷是否需要換液等操作

      什麽情況下建議選擇無酚紅培養基

      酚紅可以模擬固醇類激素的作用(特別是雌激素),幹預某些細胞在克隆級密度時生長。為避免固醇類反應,在幹細胞培養或者進行低密度細胞生長時,應使用無酚紅的培養基。

    培養基

      4、HEPES

      作用

      穩定pH值

      本身沒有營養價值,會提高滲透壓,並降低酚紅對pH值的指示作用

      什麽情況下需要加HEPES

      培養條件pH波動劇烈

      細胞對pH敏感

      Hepes的貯存液濃度一般為1M,常溫保存。培養基中的終濃度為25mM

      5、穀氨酰胺

      幾乎所有的細胞對穀氨酰胺都有較高的要求。穀氨酰胺脫掉氨基後,可作為培養細胞的能量來源,參與蛋白質的合成和能量代謝。在缺少穀氨酰胺時,細胞生長不良而死亡。所以,各種培養液中都含有較大量的穀氨酰胺。

      穀氨酰胺在溶液中很不穩定,應置-20℃冰凍保存,用前加入培養基中。加有穀氨酰胺的液體培養基4度冰箱儲存兩周以上時,應重新加入原來量的穀氨酰胺。

      試驗操作中常配製高濃度(100倍)的穀氨酰胺溶液(1ml/支),分裝使用,-20℃保存。使用時,每支1ml的穀氨酰胺加入到99ml完全培養基中,使其終濃度為2mM培養基。

      誤區:

      培養基中的穀氨酰胺容易降解,需要不斷補充

      正確方案:

      如果正確使用,一般不需要補加,如:4℃避光保存;分裝,不要反複預熱。

      6、NaHCO3

      作用

      與CO2一起形成緩衝係統,保持培養基PH值穩定。

      7、GlutaMAXTM

      GlutaMAXTM 替代L-穀氨酰胺

      極為穩定,可常溫、2~8℃以及-5~-20℃保存

      毒性氨積累小化

      使細胞的性能達到好的

      提高細胞成活和生長

      建議不要將其用於昆蟲細胞培養

      由於釋放穀氨酰胺有一定的延遲,不建議用於剛複蘇的細胞


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