被激發的細菌在半固體培養基中沿穿刺線增殖和生長。具體而言，當穿孔線擴散時，培養基的透明度降低至動態陽性；清晰的穿刺線和透明的培養基為動態陰性。
培養基的鑒定是指在培養基中加入一定的試劑或化學物質，在培養後進行一些改變，從而區分不同類型的微生物。如用於鑒定大腸杆菌的曙紅亞甲基藍培養基和用於鑒定纖維素分解菌的剛果紅培養基。
微生物培養過程中，PH變化曲線與微生物生長曲線有關。從培養開始，隨著微生物繁殖的增加，代謝物的積累加快，培養基中的Ph值也迅速變化。是酸還是堿與特定的微生物代謝產物有關。直到細菌生長曲線進入衰退期，細菌代謝趨於停滯，培養基中的代謝物和營養物質不再因微生物代謝而發生變化。這時PH的變化減小，之後不變。酸堿度的變化對微生物培養有很大影響。實踐中要不斷監測PH值的變化，利用加入緩衝體係或曝氣(氧氣或二氧化碳或其他)等多種手段，將培養體係的PH值穩定在較好的PH範圍內，從而達到微生物培養的目的。
固體培養基的形式有平板、試管斜麵和深層培養基。平板主要用於計數微生物。斜麵主要適用於純種培養。深層培養基主要適用於厭氧微生物培養。平板的優點是：1。平板表麵光滑，易於接種和塗杆。2.微生物一般隻生長在平板表麵(厭氧微生物除外)。固體培養基平板表麵積大而薄，微生物生長空間大，也節省了培養基。3.平板表麵積大，可通過調節接種濃度(或用接種針劃線)來適應。
